Applications

Analyse qualitative

Identification

Maxima d’absorption (La Pharmacopée ).
Cette technique est moins performante et moins fiable que l’IR.
Exemple : chloroquine, identifiée avec 5 maxima d’absorption (5 max différentes) .

Analyse fonctionnelle

Technique très peu utilisée, car elle permet juste la recherche des fonctions (noyau aromatique, double liaison …). Mais on utilise plutôt l’IR.

Analyse quantitative

Méthode la plus utilisée pour réaliser des dosages. 
Les dosages sont basés sur la mesure de l’absorbance.
On est parfois amené à utiliser des méthodes indirectes pour augmenter la spécificité et la sensibilité.

Méthodes directes

Elles sont basées sur les propriétés spectrales de la molécule à doser. On travaille à du maximum d’absorption, sur des composés purs (parfois nécessité d’extraction).
S’il y a superposition : On travaille à sélective

Méthodes indirectes

La molécule a un spectre pas de Problème
La molécule n’a pas de spectre: mesures
Après réaction de coloration, complexation.
On mesure l’absorbance du produit de la réaction.
On augmente ainsi la spécificité et la sensibilité.
Exemples:

• chélates
• diazocopulation:Ar-NH₂ Ar-N=N-(colorée)
• fixer -NO₂:

*Dosage du glucose, on fait réagir une glucose oxydase.
glucose oxydase
Glucose acide glucuronique + H₂O₂ 
On dose H₂O₂ en le faisant réagir sur la 4 aminoantipyrine en présence d’une peroxydase. C’est une réaction colorée.

Analyse structurale

Si le spectre varie avec le pH → 1 fonction s’ionise
Absorption à 254 → présence d’un cycle Ar , mais peu de renseignement sur la position
Analyse physicochimique:
Exemple( In: AH):
→ forme acide différentes couleurs
→ forme basique

Étude du spectre de chaque forme pure
Étude des mélanges

Détermination de pk

	AH	+	H2O		A–	+	H3O+
t0	C		–		–		–
t	C(1 – x)		…		x

(1)  

à donnée:

(2)  

(3)  

(4)  

(5)  

Détermination de la pureté

• Substance absorbe et impureté absorbe
• Substance absorbe et impureté n’absorbe pas
• Substance n’absorbe pas et impureté absorbe

Détermination de mélange de composés qui absorbe
à différentes :

à

à

2 équations à 2 inconnues

• Avec les spectromètres classiques :
  On peut résoudre 1 mélange de 2 composés
  *Par l’utilisation des spectromètres à microprocesseurs:
  On peut résoudre 1 mélange de (n) composés
  Les spectromètres de dérivée permettent la résolution à la
  nième dérivée:
  La fonction A = f()

Mesure / à la ligne de base
Mesure de pic ou de vallée
Mesure / droite tangente

Intérêt de la spectro dérivée

1. Élimination de certains dérive du signal
2. S’affranchir du trouble: T = a.C + cte ( D’’= 0)
3. Coloration parasite ( D’’= 0)
4. Étude de mélange:
   • Tracer le spectre / chaque produit pur (en mémoire)
   • Passer le mélange: l’appareil trace le spectre et les dérivées
   • et les compare avec les divers spectres en mémoire de chaque produit individuel
5. Application à l’analyse médicale:
   • Médicaments (recherche facile)
   • Milieux biologiques(élimine la coloration de fond)
   • Milieux troubles(culture de bactérie : mesure directe)

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